高壓細(xì)胞破碎儀已經(jīng)成為很多研究和生產(chǎn)平臺(tái)不可或缺的標(biāo)準(zhǔn)化流體研發(fā)生產(chǎn)工具。它具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu),均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取,加速反應(yīng)等功能,常常應(yīng)用于生物工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等。它利用高壓原理對(duì)細(xì)胞進(jìn)行擠壓破碎,細(xì)胞室的壓力隨著均質(zhì)機(jī)壓力的上升而提高,同時(shí),處在細(xì)胞室中的細(xì)胞壓力也在上升,當(dāng)樣品從均質(zhì)閥流出時(shí),細(xì)胞壁外側(cè)的壓力迅速下降,由于細(xì)胞壁內(nèi)外壓力的不同,從而導(dǎo)致了細(xì)胞的破裂,釋放出細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)。高壓細(xì)胞破碎儀不光可以破碎細(xì)胞,還可以將細(xì)胞內(nèi)部的粘性細(xì)胞液,團(tuán)聚的病毒等均質(zhì)分散開,可為后續(xù)工藝做鋪墊,提高病毒的收率。
細(xì)胞破壁的方法很多,按照是否存在外加作用力,可分為機(jī)械法和非機(jī)械法。按照物理和非物理方法可分為物理法和化學(xué)法。物理方法主要有:根據(jù)破壁溫度可分為低溫物理破壁,超低溫物理破壁;根據(jù)用力情況可分為高速撞擊破壁,剪切力破壁等,非物理方法主要有化學(xué)試劑法及生物酶解法。高壓細(xì)胞破碎一般工藝流程:首先富集菌體,收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細(xì)胞或菌體。然后進(jìn)行細(xì)胞重懸,用適當(dāng)?shù)木彌_液或培養(yǎng)液將離心或沉降等方法得到的固體(沉淀、細(xì)胞、活性物質(zhì)等等)重新懸浮。其次進(jìn)行細(xì)胞破碎,使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相中。最后收集含生化物質(zhì)的液相,進(jìn)行碎片分離,分離除去細(xì)胞、菌體、細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物,得到上清液或?yàn)V液。然后從澄清的濾液中提取胞內(nèi)產(chǎn)物,從細(xì)胞裂解物中獲取目標(biāo)產(chǎn)物。
高壓細(xì)胞破碎法屬于物理破碎細(xì)胞的方法,采用高壓細(xì)胞破碎法,處理量大、破碎速度較快,是工業(yè)上常用的破碎細(xì)胞的方法之一。對(duì)比傳統(tǒng)的細(xì)胞破壁方法,高壓細(xì)胞破壁的效果好,其破壁率與提取率都相對(duì)較高,而且其操作的設(shè)備簡(jiǎn)單,可大規(guī)模操作,操作成本低,周期較短。此過程中只發(fā)生物質(zhì)狀態(tài)的變化,而無化學(xué)反應(yīng)變化;是物質(zhì)量的分配,而不是質(zhì)的飛躍。