應(yīng)用背景
小球藻也稱綠藻,小球藻(Chlorella)為綠藻門小球藻屬普生性單細(xì)胞綠藻,是一種球形單細(xì)胞淡水藻類,內(nèi)有一個(gè)周生、杯狀或片狀的色素體。小球藻細(xì)胞直徑2~10μm,無鞭毛,無性繁殖,每個(gè)細(xì)胞可以產(chǎn)生2、4、8或16個(gè)似親孢子,成熟時(shí)母細(xì)胞破裂,孢子逸出,長大后即為新個(gè)體。新生子細(xì)胞細(xì)胞壁最薄,只有幾納米,而含有目的產(chǎn)物的大多屬于成熟細(xì)胞,細(xì)胞壁厚達(dá)20~25nm。成熟細(xì)胞細(xì)胞壁分為內(nèi)外2層:外層為耐酸的膠鞘,與雨生紅球藻一樣,內(nèi)層為類幾丁質(zhì)。
小球藻地球上最早的生命之一,出現(xiàn)在20多億年前,是一種高效的光合植物,以光合自養(yǎng)生長繁殖。小球藻分布極廣,世界各地均有分布,多生活于較小淺水,也有海產(chǎn)種類。天然條件下個(gè)體較少,人工培養(yǎng)大量繁殖。細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物含量都很高,又有多種維生素,可食用和作為餌料。小球藻細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)類似于植物細(xì)胞的初生細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)。纖維束直徑為3~5nm,分2個(gè)方向不規(guī)則地連續(xù)交織在一起,細(xì)胞壁的內(nèi)側(cè)和外側(cè)結(jié)構(gòu)上沒有明顯差別,細(xì)胞壁中不含有木質(zhì)素。小球藻細(xì)胞壁成分受培養(yǎng)條件的影響很大。比如二氧化碳濃度升高時(shí),會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞壁糖醛酸和氨基糖含量升高,而中性糖組分降低。而在高鹽培養(yǎng)基中,小球藻細(xì)胞壁的厚度會(huì)增加70%。近幾年小球藻屬在單細(xì)胞蛋白的生產(chǎn)、生物能源等領(lǐng)域一直是研發(fā)熱點(diǎn)。
經(jīng)過降溫預(yù)處理微藻物料通過柱塞作用進(jìn)入均質(zhì)腔體,被柱塞壓縮的微藻物料內(nèi)積聚了極高的能量,當(dāng)物料通過窄縫后瞬間失壓,造成內(nèi)部高能釋放引起空穴爆炸而強(qiáng)烈膨脹,產(chǎn)生空穴效應(yīng),致使物料強(qiáng)烈粉碎細(xì)化。同時(shí),瞬間失壓的小球藻物料以極高的流速快速噴出,撞擊在用特殊材料制成的質(zhì)地堅(jiān)硬的撞擊環(huán)上,產(chǎn)生強(qiáng)大的沖撞力,造成物料粉碎。另外,碰撞前后的小球藻物料隨液體高速運(yùn)動(dòng),通過泵腔內(nèi)通道和閥口狹縫時(shí)會(huì)產(chǎn)生巨大的剪切力。在撞擊效應(yīng)、剪切效應(yīng)和空穴效應(yīng)聯(lián)合作用下濕物料小球藻的細(xì)胞壁在瞬間就完成了細(xì)胞破碎。
高壓細(xì)胞破碎儀是生物工程中一種重要的實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)設(shè)備,能夠快速、高效地將細(xì)胞破碎并釋放其胞內(nèi)物質(zhì)。高壓細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu),均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反應(yīng)等功能,故廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等等實(shí)驗(yàn)室研究或企業(yè)生產(chǎn)。高壓細(xì)胞破碎儀是胞內(nèi)物質(zhì)(蛋白質(zhì)、酶、核酸、DNA/RNA)的提取和均質(zhì)主要的樣品制備手段,可用于蛋白質(zhì)研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic(原核)、eurkaryotic細(xì)胞等,是生物工程及生物制藥等行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。