應(yīng)用背景
電鏡下輪狀病毒呈二十面對(duì)稱球形顆粒,三層衣殼(外殼、內(nèi)殼、核殼),外型似車輪，故命名為“輪狀病毒”ERotavirus)。輪狀病毒屬呼腸孤病毒科，病毒基因組為含11節(jié)段的雙鏈RNA。主要結(jié)構(gòu)蛋白為(外殼VP4和VP7,內(nèi)殼VP6)。1973年由澳大利亞科學(xué)家Bishop首次發(fā)現(xiàn)，人輪狀病毒是嬰幼兒腹瀉最重要的病毒病原。輪狀病毒疫苗是預(yù)防輪狀病毒腸炎的疫苗，輪狀病毒疫苗并非滅活疫苗，而是減毒活疫苗，輪狀病毒疫苗屬于減毒的重組活疫苗。
應(yīng)用案例
20世紀(jì)60年代以后，用細(xì)胞作為病毒培養(yǎng)基質(zhì)制備的狂犬病疫苗逐漸取代了神經(jīng)組織和禽胚疫苗，其中細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)主要有動(dòng)物細(xì)胞(包括原代地鼠腎細(xì)胞、雞胚細(xì)胞及傳代Vero細(xì)胞)和人二倍體細(xì)胞。輪狀病毒活疫苗具有傳代歷史清楚、病毒抗原式清楚、毒種遺傳性狀穩(wěn)定、利用病毒的種屬差異，對(duì)人類天然減毒、試驗(yàn)減毒選育，進(jìn)一步降低了毒性等安全性。人和動(dòng)物輪狀病毒的VP6具有相同的抗原性，且動(dòng)物毒株比人RV毒株易于在組織培養(yǎng)中生長，且對(duì)人天然減毒，這是研究輪狀病毒減毒活疫苗的研制理論基礎(chǔ)。利用動(dòng)物輪狀病毒對(duì)人無致病性并有良好免疫原性(與HRV有共同抗原)預(yù)防人類A群輪狀病毒腹瀉，這是輪狀病毒疫苗苗的制備原理。經(jīng)技術(shù)處理后HAV毒力較弱，不會(huì)造成排毒期相互感染，這是減毒活疫苗較滅活苗優(yōu)越性。
解決方案
通過菌種轉(zhuǎn)基因的方式表達(dá)蛋白或核酸等物質(zhì)，然后經(jīng)過破壁后提取細(xì)胞內(nèi)酶、蛋白質(zhì)等活性的產(chǎn)物是生物工程中的重要技術(shù)。首先富集菌體，收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細(xì)胞或菌體。然后進(jìn)行細(xì)胞重懸，用適當(dāng)?shù)木彌_液或培養(yǎng)液將離心或沉降等方法得到的固體（沉淀、細(xì)胞、活性物質(zhì)等等）重新懸浮。其次進(jìn)行細(xì)胞破碎，使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相中。最后收集含生化物質(zhì)的液相，進(jìn)行碎片分離，分離除去細(xì)胞、菌體、細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物，得到上清液或?yàn)V液。然后從澄清的濾液中提取胞內(nèi)產(chǎn)物，從細(xì)胞裂解物中獲取目標(biāo)產(chǎn)物。
應(yīng)用設(shè)備
高壓細(xì)胞破碎儀是生物工程中一種重要的實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)設(shè)備，能夠快速、高效地將細(xì)胞破碎并釋放其胞內(nèi)物質(zhì)。高壓細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)，均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反應(yīng)等功能，故廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等等實(shí)驗(yàn)室研究或企業(yè)生產(chǎn)。高壓細(xì)胞破碎儀是胞內(nèi)物質(zhì)（蛋白質(zhì)、酶、核酸、DNA/RNA）的提取和均質(zhì)主要的樣品制備手段，可用于蛋白質(zhì)研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic（原核）、eurkaryotic細(xì)胞等，是生物工程及生物制藥等行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。
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