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納通細(xì)胞破壁儀-畢赤酵母

發(fā)布日期:2023-08-09   瀏覽次數(shù):395次

1.jpg 應(yīng)用背景

酵母表達(dá)系統(tǒng)分為釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)和甲醇營養(yǎng)性酵母表達(dá)系統(tǒng),后者(如畢赤酵母)是目前應(yīng)用廣泛的酵母表達(dá)系統(tǒng)。酵母表達(dá)系統(tǒng)是工業(yè)微生物中應(yīng)用較廣泛的系統(tǒng)。酵母表達(dá)系統(tǒng)兼有原核和高等真核系統(tǒng)的優(yōu)點,既有原核表達(dá)的周期短、成本低、易操作,適合工業(yè)級別放大培養(yǎng)等優(yōu)點;同時具備了真核細(xì)胞對蛋白的糖基化修飾,空間折疊等能力,使得蛋白折疊保真性和可溶性都大幅度提高,是重組蛋白表達(dá)的強(qiáng)有力工具。



1.jpg 應(yīng)用案例

       畢赤酵母體系是真核體系中操作簡單、成本低廉的系統(tǒng),在蛋白加工、折疊、翻譯后修飾等方面具有諸多優(yōu)勢,在畢赤酵母體系中蛋白轉(zhuǎn)錄后糖基化所增加的寡糖鏈長度(平均每個支鏈8-14 個甘露糖殘基)非常接近高等真核生物的結(jié)構(gòu),活性幾率大大高于原核體系。與其他表達(dá)系統(tǒng)的基因存在于游離質(zhì)粒上不同,它的表達(dá)質(zhì)粒是通過同源重組整合在基因組上的,轉(zhuǎn)化簡單(不需要病毒原液),表達(dá)菌株可以長時間保持(大于10年)而不失活。與其他表達(dá)系統(tǒng)相比,具有使用簡單、表達(dá)量高、可大規(guī)模生產(chǎn)、相對低廉的價格、有很多真核的翻譯后修飾和加工、大蛋白能較好地折疊等特點。適合于穩(wěn)定表達(dá)有功能的外源蛋白質(zhì),而且可大規(guī)模發(fā)酵,是理想的重組真核蛋白生產(chǎn)制備工具。





1.jpg 解決方案

       高壓均質(zhì)使酵母細(xì)胞破壁,酵母中更多的自溶物就更容易的釋放到水環(huán)境中,進(jìn)一步的抽提量也就增加。高壓均質(zhì)處理后酵母細(xì)胞壁破損使胞內(nèi)物不再受細(xì)胞壁的限制,酶和底物的反應(yīng)空間更加充足,反應(yīng)產(chǎn)物的抑制作用減小,既增大了酶的活性,又保持酶的活力,還加快反應(yīng)速度。酵母菌一般需要1300bar的壓力破碎3-4遍,破碎率可以達(dá)到 90%以上,常見的典型應(yīng)用:HPV疫苗、諾如病毒疫苗、乙肝疫苗、手足口病疫苗等。




1.jpg 應(yīng)用設(shè)備

       高壓細(xì)胞破碎儀是生物工程中一種重要的實驗、生產(chǎn)設(shè)備,能夠快速、高效地將細(xì)胞破碎并釋放其胞內(nèi)物質(zhì)。高壓細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu),均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反應(yīng)等功能,故廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等等實驗室研究或企業(yè)生產(chǎn)。高壓細(xì)胞破碎儀是胞內(nèi)物質(zhì)(蛋白質(zhì)、酶、核酸、DNA/RNA)的提取和均質(zhì)主要的樣品制備手段,可用于蛋白質(zhì)研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic(原核)、eurkaryotic細(xì)胞等,是生物工程及生物制藥等行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。



1.jpg 納通優(yōu)勢
       畢赤酵母,一種具有高表達(dá)能力和穩(wěn)定性的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng),是目前僅次于大腸桿菌的常見的蛋白表達(dá)系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于實驗室及生產(chǎn)規(guī)模蛋白質(zhì)制備、表征以及結(jié)構(gòu)解析等方面。它具有高效、穩(wěn)定的蛋白質(zhì)表達(dá)性能,能夠抵御各種逆境,并且在發(fā)酵過程中不需要使用抗生素。這些特點使得畢赤酵母成為了一種重要的生物表達(dá)系統(tǒng),為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了無限可能。酵母菌一般需要1300bar的壓力破碎3-4遍,破碎率可以達(dá)到 90%以上,常見的典型應(yīng)用:HPV疫苗、諾如病毒疫苗、乙肝疫苗、手足口病疫苗等。
◆破壁能力:高壓設(shè)計,輕松上壓;均質(zhì)效率高,工藝穩(wěn)定;穩(wěn)定的破碎能力,更高的胞內(nèi)物提??;純機(jī)械破碎,無化學(xué)污染;可放大工業(yè)化生產(chǎn)工藝設(shè)備
◆控溫效果:獨特溫控設(shè)計,內(nèi)置和外置雙向控溫,確保均質(zhì)過程及出料溫度可控
◆活性保障:循環(huán)的控溫系統(tǒng),蛋白活性不失活,細(xì)胞破碎后,活性保值高達(dá)99%
◆無菌保障:金屬結(jié)構(gòu)連接,沒有O型圈或墊片,無死角設(shè)計;在線排空結(jié)構(gòu)設(shè)計;所有機(jī)型均可實現(xiàn)在線清洗(CIP)、循環(huán)清洗、拆裝清洗、在位滅菌(SIP)


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