應(yīng)用背景
哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)蛋白表達(dá)是廣為應(yīng)用的人類復(fù)雜糖基化蛋白的表達(dá)系統(tǒng)，也是活性蛋白因子及各類受體蛋白的優(yōu)異表達(dá)系統(tǒng)。哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能夠?yàn)橹亟M人源蛋白提供更接近于天然狀態(tài)的翻譯后修飾、蛋白質(zhì)折疊和聚合，具備活性蛋白所必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾。在蛋白表達(dá)過(guò)程中會(huì)形成接近天然蛋白的蛋白質(zhì)折疊和聚合，具備活性蛋白所必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾，60%以上的的藥用蛋白產(chǎn)品由哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)獲得。在科研領(lǐng)域，為了獲得有活性的重組蛋白，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)是更好方案。
應(yīng)用案例
20世紀(jì)60年代以后，用細(xì)胞作為病毒培養(yǎng)基質(zhì)制備的狂犬病疫苗逐漸取代了神經(jīng)組織和禽胚疫苗，其中細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)主要有動(dòng)物細(xì)胞包括原代地鼠腎細(xì)胞、雞胚細(xì)胞及傳代Vero細(xì)胞。常規(guī)實(shí)驗(yàn)中使用最多的宿主細(xì)胞是HEK 293細(xì)胞和CHO細(xì)胞，前者一般用于重組蛋白的瞬時(shí)表達(dá)，用于在短時(shí)間內(nèi)獲得少量具有生物活性的重組蛋白；而后者一般用于重組蛋白的穩(wěn)定表達(dá)，CHO細(xì)胞由于其遺傳性狀穩(wěn)定、生長(zhǎng)速度較快、能夠耐受一定的剪切力及滲透壓且具有和人類相似的糖基化修飾等優(yōu)點(diǎn)，在工業(yè)生產(chǎn)和醫(yī)療方面發(fā)揮著重要的作用。
解決方案
通過(guò)菌種轉(zhuǎn)基因的方式表達(dá)蛋白或核酸等物質(zhì)，然后經(jīng)過(guò)破壁后提取細(xì)胞內(nèi)酶、蛋白質(zhì)等活性的產(chǎn)物是生物工程中的重要技術(shù)。首先富集菌體，收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細(xì)胞或菌體。然后進(jìn)行細(xì)胞重懸，用適當(dāng)?shù)木彌_液或培養(yǎng)液將離心或沉降等方法得到的固體（沉淀、細(xì)胞、活性物質(zhì)等等）重新懸浮。其次進(jìn)行細(xì)胞破碎，使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相中。最后收集含生化物質(zhì)的液相，進(jìn)行碎片分離，分離除去細(xì)胞、菌體、細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物，得到上清液或?yàn)V液。然后從澄清的濾液中提取胞內(nèi)產(chǎn)物，從細(xì)胞裂解物中獲取目標(biāo)產(chǎn)物。
應(yīng)用設(shè)備
高壓細(xì)胞破碎儀是生物工程中一種重要的實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)設(shè)備，能夠快速、高效地將細(xì)胞破碎并釋放其胞內(nèi)物質(zhì)。高壓細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)，均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反應(yīng)等功能，故廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等等實(shí)驗(yàn)室研究或企業(yè)生產(chǎn)。高壓細(xì)胞破碎儀是胞內(nèi)物質(zhì)（蛋白質(zhì)、酶、核酸、DNA/RNA）的提取和均質(zhì)主要的樣品制備手段，可用于蛋白質(zhì)研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic（原核）、eurkaryotic細(xì)胞等，是生物工程及生物制藥等行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。
納通優(yōu)勢(shì)
服務(wù)熱線：19951928856