細(xì)胞破壁方法選哪個(gè)？
發(fā)布日期：2023-09-11 瀏覽次數(shù)：289次
細(xì)胞破壁的方法很多，按照是否存在外加作用力，可分為機(jī)械法和非機(jī)械法，故細(xì)胞破碎原理可規(guī)納為機(jī)械破碎原理和非機(jī)械破碎原理兩大類。影響機(jī)械法破碎的因素有細(xì)胞的大小和形狀、細(xì)胞壁的厚度、聚合物交聯(lián)程度。顯然，細(xì)胞個(gè)體小、球形、壁厚、聚合物交聯(lián)程度高是最難破碎的；影響非機(jī)械法破碎的因素有細(xì)胞壁、膜的組成和結(jié)構(gòu)。了解細(xì)胞壁的組成和結(jié)構(gòu)，就可以選擇合適的溶菌酶和化學(xué)試劑，以及在使用多種酶或化學(xué)試劑相結(jié)合時(shí)確定其使用的順序。
物理破碎法的缺點(diǎn)是高能、高溫、高噪音、高剪切力，易使產(chǎn)品變形失活；非專一性，胞內(nèi)產(chǎn)物均釋放，分離純化困難；細(xì)胞碎片大小不一，難分離?；瘜W(xué)破碎法缺點(diǎn)是費(fèi)用高；引起新的污染，尤其是其他化學(xué)方法；一般只有有限的破碎，常需與其他物理法連用。酶解需要選擇適宜的酶和酶系統(tǒng)，并要決定特定的反應(yīng)條件，還常附加其他的處理，如輻照、加高濃度鹽及EDTA，或者利用生物因素等促使微生物對(duì)酶解作用敏感，以獲得一定的效果。
破碎方法選擇的一般原則是提取產(chǎn)物在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，用機(jī)械法破碎；提取產(chǎn)物在細(xì)胞膜附近，用化學(xué)法；提取產(chǎn)物與細(xì)胞膜和細(xì)胞壁結(jié)合，可采用化學(xué)法和機(jī)械法結(jié)合的方法。選擇合適的破碎方法需要考慮細(xì)胞的數(shù)量、目的產(chǎn)物對(duì)破碎條件（溫度、化學(xué)試劑、酶等）的敏感性；破碎程度及破碎速度;細(xì)胞壁的堅(jiān)韌長(zhǎng)度；產(chǎn)物的性質(zhì)如耐酸、耐熱等。每一步應(yīng)注意全面考慮操作度、對(duì)細(xì)胞的剪切程度、蛋白酶的失活作用等。
綜上所述，細(xì)胞破壁的方法很多，細(xì)胞破碎機(jī)的原理通常涉及機(jī)械破碎、超聲波破碎、高壓破碎和化學(xué)破碎等方法。對(duì)比傳統(tǒng)的細(xì)胞破壁方法，高壓細(xì)胞破壁的效果好，其破壁率與提取率都相對(duì)較高，而且其操作的設(shè)備簡(jiǎn)單，可大規(guī)模操作，操作成本低，周期較短。此過程中只發(fā)生物質(zhì)狀態(tài)的變化，而無化學(xué)反應(yīng)變化；是物質(zhì)量的分配，而不是質(zhì)的飛躍。
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