應(yīng)用背景
疫苗是將病原微生物(如細菌、立克次氏體、病毒等)及其代謝產(chǎn)物,經(jīng)過人工減毒、滅活或利用轉(zhuǎn)基因等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動免疫制劑。疫苗保留了病原菌刺激動物體免疫系統(tǒng)的特性。當動物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后,免疫系統(tǒng)便會產(chǎn)生一定的保護物質(zhì),如免疫激素、活性生理物質(zhì)、特殊抗體等;當動物再次接觸到這種病原菌時,動物體的免疫系統(tǒng)便會依循其原有的記憶,制造更多的保護物質(zhì)來阻止病原菌的傷害。細胞基質(zhì)作為主要原材料,其質(zhì)量的優(yōu)劣,直接影響疫苗的質(zhì)量和產(chǎn)量,尤其是疫苗的安全性。二倍體細胞與原代細胞相比,具有能夠充分鑒定和標準化的優(yōu)點,可實現(xiàn)細胞種子庫系統(tǒng),建立的細胞庫可多年用于生產(chǎn),有利于質(zhì)量控制。
水痘減毒疫苗是將水痘病毒Oka株在MRC-5人二倍體細胞培養(yǎng)繁殖而獲得的病毒凍干制品。Oka株水痘病毒是被WHO推薦用于生產(chǎn)水痘活疫苗的減毒株,水痘疫苗以MRC-5人二倍體細胞為基質(zhì),建立制備Oka株水痘減毒活疫苗的生產(chǎn)工藝。以每劑疫苗含有不少于103.3蝕斑形成單位(PFU)的水痘-帶狀皰疹病毒。二倍體細胞與傳代細胞相比,理論上不存在致腫瘤的潛在危險性,具有無潛在致癌性,安全性優(yōu)異;病毒敏感譜廣泛,適用于多種病毒生產(chǎn);無動物源蛋白、因子污染;二倍體細胞生產(chǎn)的滅活病毒免疫原性高、免疫應(yīng)答快、免疫持續(xù)時間長等優(yōu)點。
通過菌種轉(zhuǎn)基因的方式表達蛋白或核酸等物質(zhì),然后經(jīng)過破壁后提取細胞內(nèi)酶、蛋白質(zhì)等活性的產(chǎn)物是生物工程中的重要技術(shù)。首先富集菌體,收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細胞或菌體。然后進行細胞重懸,用適當?shù)木彌_液或培養(yǎng)液將離心或沉降等方法得到的固體(沉淀、細胞、活性物質(zhì)等等)重新懸浮。其次進行細胞破碎,使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相中。最后收集含生化物質(zhì)的液相,進行碎片分離,分離除去細胞、菌體、細胞碎片、蛋白質(zhì)的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物,得到上清液或濾液。然后從澄清的濾液中提取胞內(nèi)產(chǎn)物,從細胞裂解物中獲取目標產(chǎn)物。
高壓細胞破碎儀是生物工程中一種重要的實驗、生產(chǎn)設(shè)備,能夠快速、高效地將細胞破碎并釋放其胞內(nèi)物質(zhì)。高壓細胞破碎儀具有破碎組織、細菌、病毒、孢子及其它細胞結(jié)構(gòu),均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反應(yīng)等功能,故廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、細胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等等實驗室研究或企業(yè)生產(chǎn)。高壓細胞破碎儀是胞內(nèi)物質(zhì)(蛋白質(zhì)、酶、核酸、DNA/RNA)的提取和均質(zhì)主要的樣品制備手段,可用于蛋白質(zhì)研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic(原核)、eurkaryotic細胞等,是生物工程及生物制藥等行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)的標準設(shè)備。