應(yīng)用背景
CHO細(xì)胞是中國倉鼠卵巢細(xì)胞，1957年美國科羅拉多大學(xué)Dr.Theodore T.Puck從一成年雌性倉鼠卵巢分離獲得，是生物工程上廣泛使用的細(xì)胞系。分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)等學(xué)科的發(fā)展使基因工程具有越來越重要的地位。在基因工程研究的動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中，最具代表性的就是中國倉鼠卵巢細(xì)胞(ChineseHamster Ovary,CHO)。CHO細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞，屬于成纖維細(xì)胞，可貼壁培養(yǎng)，經(jīng)多次傳代篩選后也可懸浮培養(yǎng),它是用來表達(dá)外源蛋白最多也最成功的一類細(xì)胞。
應(yīng)用案例
重組人粒細(xì)胞刺激因子（CHO細(xì)胞）系由高效表達(dá)人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)基因的大腸桿菌，利用基因重組技術(shù)經(jīng)發(fā)酵、分離和高度純化后制成。與天然產(chǎn)品相比，生物活性在體內(nèi)、外基本一致。G-CSF是調(diào)節(jié)骨髓中粒系造血的主要細(xì)胞因子之一，可選擇性地作用于粒系造血祖細(xì)胞，促進(jìn)其增殖、分化，并可增加粒系終末分化細(xì)胞即外周血中性粒細(xì)胞的數(shù)目與功能。
解決方案
CHO細(xì)胞是一種非分泌細(xì)胞，本身很少分泌內(nèi)源蛋白，因此對目標(biāo)蛋白分離純化十分有利；形成有活性二聚體，具有糖基化功能，是表達(dá)復(fù)雜生物大分子的理想宿主；具有不死性，可傳百代以上，是生物工程廣泛使用的細(xì)胞系。CHO細(xì)胞比微生物細(xì)胞更大，無細(xì)胞壁，機(jī)械強(qiáng)度較低，對剪切力敏感，環(huán)境適應(yīng)能力差；配增時間長，生長緩慢，易受微生物污染；培養(yǎng)過程中細(xì)胞相互粘連以集群形式存在培養(yǎng)過程需氧量少，代謝產(chǎn)物具有生物活性，生產(chǎn)成本高。真核細(xì)胞中CHO細(xì)胞是目前重組糖基蛋白生產(chǎn)的首選體系,CHO細(xì)胞培養(yǎng)可在人工控制條件的生物反應(yīng)器中大規(guī)模培養(yǎng)。大腸桿菌(E.coli)是使用最早的表達(dá)系統(tǒng)，其顯著優(yōu)點(diǎn)是易于操作，產(chǎn)量高，成本低。但由于用E.coli生產(chǎn)的蛋白質(zhì)藥物因缺乏糖基化而在人體內(nèi)易被降解，因此它的藥放大大降低。此外，它還存在易產(chǎn)生內(nèi)毒素和包涵體的問題。
應(yīng)用設(shè)備
高壓細(xì)胞破碎儀是生物工程中一種重要的實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)設(shè)備，能夠快速、高效地將細(xì)胞破碎并釋放其胞內(nèi)物質(zhì)。高壓細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)，均質(zhì)、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反應(yīng)等功能，故廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、微生物工程、生物化學(xué)、表面化學(xué)、藥物化學(xué)、生物醫(yī)藥、生物制品等等實(shí)驗(yàn)室研究或企業(yè)生產(chǎn)。高壓細(xì)胞破碎儀是胞內(nèi)物質(zhì)（蛋白質(zhì)、酶、核酸、DNA/RNA）的提取和均質(zhì)主要的樣品制備手段，可用于蛋白質(zhì)研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic（原核）、eurkaryotic細(xì)胞等，是生物工程及生物制藥等行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。
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